Clinical and molecular aspects of a pediatric metachronous adrenocortical tumor / Aspectos clínicos e moleculares de tumor adrenocortical metacrônico pediátrico

The occurrence of metachronous adrenocortical carcinoma has rarely been described. We report a case of a child with virilizing adrenocortical metachronous tumors that, despite several metastases, presented long-term survival (15 years). We analyzed in this tumor IGF2, IGF1R and FGFR4 gene expression, and evaluated the presence of p.R337H germline p53 mutation and somatic CTNNB1 mutation. IGF2 gene was over-expressed in both left (Weiss score 5) and right (Weiss 7) adrenocortical tumors. IGF1R expression levels were higher in the right adrenocortical tumor. FGFR4 over-expression was also detected in the right adrenocortical tumor. In addition, this patient harbors the germline p.R337H p53 mutation and loss of heterozygosity (LOH) was detected in the tumors. No somatic CTNNB1 mutations were found in both tumors. In conclusion, we demonstrated in this unusual case the over-expression of growth signaling pathways, which are molecular mechanisms previously related to adrenocortical tumorigenesis. Furthermore, the absence of somatic CTNNB1 mutations, which is a molecular marker of poor prognosis in adults, might be related to the long-term survival of this patient.

A ocorrência de carcinomas adrenocorticais metacrônicos é raramente relatada. Descrevemos o caso de uma criança portadora de tumor adrenocortical virilizante metacrônico que, apesar das inúmeras metástases, apresentou uma longa sobrevida (15 anos). Analisamos nesse tumor a expressão gênica de IGF2, IGF1R e FGFR4 e avaliamos a presença da mutação germinativa R337H no p53 e mutação somática no gene CTNNB1. O gene IGF2 foi hiperexpresso nos tumores adrenocorticais esquerdo (Weiss 5) e direito (Weiss 7). Os níveis de expressão de IGF1R foram maiores no tumor direito. Hiperexpressão do gene FGFR4 também foi observada no tumor adrenocortical direito. Esse paciente é portador da mutação germinativa R337H no p53, e perda de heterozigose (LOH) foi observada em ambos os tumores. Não foram encontradas mutações no gene CTNNB1 nos tumores. Em conclusão, demonstramos neste caso a hiperexpressão de vias moleculares de crescimento, que são mecanismos previamente relacionados à tumorigênese adrenocortical. Além disso, não encontramos mutações somáticas no gene CTNNB1, que é um marcador molecular de mau prognóstico em adultos e poderia estar relacionado à longa sobrevida desse paciente.

Papel da via lkaros-FGFR4 na evolução pós-cirúrgica dos pacientes com Doença de Cushing / Ikaros-FGFR4 pathway role in the postoperative outcome of Cushing's Disease

Os mecanismos envolvidos na patogênese molecular dos tumores hipofisários corticotróficos são complexos, heterogêneos e permanecem na maioria dos casos desconhecidos. Alterações da expressão de componentes da via Ikaros (Ik), tais como do receptor 4 dos fatores de crescimento de fibroblastos (FGFR4) têm sido detectadas em tumores hipofisários, inclusive nos corticotropinomas. O desbalanço entre as isoformas longas e curtas do Ikaros resulta em um início de transcrição alternativa do FGFR4, codificando uma isoforma truncada do gene (pdt- FGFR4) que foi associada a tumores hipofisários maiores e mais invasivos. A isoforma curta Ik6 promove a expressão do fator anti-apoptótico Bcl-XL in vitro, um efeito independente da interação com as isoformas longas. Além disso, um polimorfismo do FGFR4, com substituição da glicina por arginina no códon 388 (G388R), tem sido associado à evolução desfavorável em vários tipos tumorais humanos. Objetivos: Analisar a expressão do Bcl-XL, das isoformas do Ikaros (Ik1+Ik2/Ik total) e do FGFR4 em corticotropinomas humanos. Avaliar a freqüência dos genótipos do códon 388 do FGFR4 nos pacientes com doença de Cushing e sua associação com a evolução pósoperatória após a primeira cirurgia transesfenoidal. Métodos: Noventa e sete pacientes com diagnóstico de doença de Cushing foram estudados. Os dados clínicos, hormonais e histopatológicos foram avaliados retrospectivamente. O estudo da expressão do Bcl-XL, do Ikaros, e do FGFR4 foi realizado por PCR em tempo real em 20 amostras de corticotropinomas, sendo dois tumores correspondentes à síndrome de Nelson. A determinação dos genótipos no códon 388 do FGFR4 foi realizada nos 97 pacientes e em 103 indivíduos controles, por PCR de fragmento do exon 9 do gene FGFR4 seguida de digestão com a enzima de restrição BstNI. A evolução pós-operatória (remissão/recidiva) da doença de Cushing foi avaliada em 76 pacientes. Foram considerados em remissão aqueles pacientes com níveis normais...

The mechanisms involved in the molecular pathogenesis of corticotroph pituitary tumors are complex, heterogeneous and in most cases remain unknown. Changes in the expression of components of Ikaros (Ik) pathway, such as receptor 4 of fibroblast growth factor (FGFR4), have been detected in pituitary tumors including corticotropinomas. Imbalance between long and short Ik isoforms results in alternative transcription initiation of FGFR4 and encodes a truncated isoform of the gene (pdt-FGFR4) which was associated with larger and more invasive pituitary tumors. The Ik6 short isoform promotes Bcl-XL expression in vitro, an effect independent of the interaction with the long isoforms. In addition, a polymorphism of FGFR4 gene, the substitution of glycine by arginine at codon 388 (G388R), has been associated with adverse outcome in several human tumor types. Objectives: To analyze the expression of Bcl-XL, Ikaros isoforms (Ik1 + Ik2/Ikaros total), and FGFR4 in human corticotropinomas. To determine the frequency of each genotype at codon 388 of FGFR4 in patients with Cushing's disease and its association with the postoperative outcome after the first transsphenoidal surgery. Methods: Ninety-seven patients with Cushing's disease were evaluated. Clinical, hormonal and histopathological findings were assessed retrospectively. The expression of Bcl-XL, Ikaros and FGFR4 were evaluated by real-time PCR in 20 samples of corticotropinomas, including two samples of Nelson's syndrome. The FGFR4 genotype was determined in the 97 patients and 103 control subjects by PCR fragment of exon 9 of the FGFR4 gene, followed by digestion with the BstNI restriction enzyme. The postoperative outcome (remission/relapse) of Cushing's disease was assessed in 76 patients. The patients with normal urinary cortisol levels during the first year after surgery, in the absence of hormone replacement therapy, and those who...

Absence of PRKAR1A loss of heterozygosity in laser-captured microdissected pigmented nodular adrenocortical tissue from a patient with Carney complex caused by the novel nonsense mutation p. Y21X / Ausência da perda de heterozigose do PRKAR1A em células capturadas por microdissecção a laser de tecido de nódulo pigmentoso adrenocortical de um paciente com complexo de Carney causado por uma nova mutação nonsense

OBJECTIVE: Primary pigmented nodular adrenocortical disease (PPNAD) is the main endocrine manifestation of Carney complex, a multiple neoplasia syndrome caused by PRKAR1A gene mutations. The presence of PRKAR1A loss of heterozygosity (LOH) in adrenocortical tumorigenesis remains controversial. The aim of the present study is to investigate the presence of PRKAR1A LOH in adrenocortical cells in a patient with Carney complex. METHODS: The LOH was investigated using a PRKAR1A informative intragenic marker by GeneScan software analysis in DNA obtained from laser-captured microdissected cells of several adrenal nodules. Patients: A young adult male patient with Carney complex and his family were studied. RESULTS: A novel heterozygous mutation (p. Y21X) was identified at PRKAR1A in blood DNA of the male proband and his relatives. No PRKAR1A LOH was evidenced in the laser-captured microdissected cells from PPNAD tissue by different methodologies. CONCLUSION: We identified a new PRKAR1A nonsense mutation and in addition we did not evidence PRKAR1A LOH in laser-captured nodules cells, suggesting that adrenocortical tumorigenesis in PPNAD may occurs apart from the second hit.

OBJETIVO: A doença adrenocortical nodular pigmentosa primária (PPNAD) é uma das manifestações do complexo de Carney, uma neoplasia endócrina múltipla causada por mutações no PRKAR1A. A perda de heterozigose (LOH) do PRKAR1A na tumorigenese adrenal permanece controversa dada à possibilidade de contaminação com o tecido normal. Nosso objetivo foi investigar a presença de LOH no PRKAR1A a partir de células do nódulo adrenal de um paciente com complexo de Carney. MÉTODOS: A pesquisa da LOH do PRKAR1A foi realizada através do estudo de um marcador intragênico em DNA de células do nódulo adrenal microdissecadas a laser, evitando contaminação com o tecido normal. Pacientes: Um paciente com PPNAD e cinco familiares foram estudados. RESULTADOS: A nova mutação (p. Y21X) foi identificada no PRKAR1A sem evidência de LOH no tecido adrenal. CONCLUSÃO: Identificamos uma nova mutação no PRKAR1A e não evidenciamos LOH nas células dos nódulos adrenocorticais, sugerindo que a PPNAD possa ocorrer na ausência de um segundo evento molecular.